發布時間:2024-03-07 閱讀量:836
【專題】IKN乳化機在疫苗上的應用專題
多肽疫苗的生產工藝
1、NDV 的增殖與滅活 將保存的NDV 種毒用滅菌生理鹽水(內含青霉素、慶大霉素) 按一定比例稀釋后,作用15~20min , 以每胚012ml 接種10 日齡的雞胚尿囊腔,37 ℃繼續孵化96h 后,活胚0~4 ℃冷卻6~10h , 無菌收取雞胚尿囊液裝入滅菌大瓶中,吸取混合后的尿囊液1ml , 檢測HA 效價,同時將大瓶中尿囊液按012 % 的比例加入福爾馬林,于37 ℃滅活20~24h , 經無菌檢驗合格后,放入低溫冰柜保存備用。
2、AIV 的增殖與滅活 將保存的AIV 種毒按上述稀釋后,以每胚012ml 接種11 日齡雞胚, 37 ℃培養30h , 收獲培養后的死亡胚及存活胚的尿素液。吸取混合后的尿囊液檢測HA 效價,同時,將大瓶中尿囊液按013 % 比例加入福爾馬林, 于37 ℃滅活24h , 經無菌檢驗合格者低溫冰柜保存備用。
3、油相制備 取94 份7 號白油,6 份司本-80 混合后,以一定的比例加入硬脂酸鋁,然后加熱直到完全溶解制成油相備用。
4、水相制備取94 份7 號白油,6 份司本-80 混合后,以一定的比例加入硬脂酸鋁,然后加熱直到完全溶解制成油相備用。
二聯油乳劑滅活苗的生產工藝:
1、將檢驗合格的3種制苗用病毒液按一定比例混合,取96份混合病毒液與4份無菌吐溫80充分混合,使吐溫80完全溶解,制成內部水相。
2、取少量白油與一定量的硬脂酸鋁混合,加熱熔化后再與適量司本80及白油混合均勻制成油相,并使白油、司本80和硬脂酸鋁的終濃度分別達到一定的比例;油相經116 ℃高壓滅菌30 min后備用。
3、 取適量吐溫80、油酸和丙二醇充分混合,制得外部水相乳化劑,然后再與病毒液充分混合,制成外部水相。
采用二步乳化法制備疫苗。
第一步:按內部水相與油相比為4∶6的比例,將內部水相緩慢加入到低速攪拌的油相中,初步乳化后,高速乳化幾分鐘,制成W/O一級油乳劑疫苗;
第二步:按W/O一級油乳劑疫苗與外部水相的體積比為5∶1的比例,將W/O一級油乳劑疫苗加入到外部水相中,并按不同的乳化速度乳化疫苗,制成雞新城疫-傳染性支氣管炎-減蛋綜合征三聯復乳疫苗,檢查不同乳化速度制備疫苗的穩定性。
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